1. data.fda.gov.tw
  2. 食品法規條文資料集
  3. 1416825
column value
類別 食品輸入及查驗登記
法規性質 法規命令
法規名稱 健康食品之促進鐵吸收功能評估方法
條文內容 <p style="text-align: center; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 16pt;">健康食品之促進鐵吸收功能評估方法</span></strong><strong> </strong></p><p style="text-align: right; line-height: 18pt;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 10pt;">衛署食字第</span><span style="font-family: arial; font-size: 10pt;">0950405557</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 10pt;">號公告附件</span> </p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 14pt;">一、背景說明</span></strong><sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 14pt;">(1-16)</span></sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 16px;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; 根據聯合國糧農組織與世界衛生組織 (FAO/WHO) 之報告，缺鐵仍是不可忽視的營養缺乏問題之一，除了盛行於經濟落後與開發中國家之外，在經濟富裕之歐美先進國家也沒有完全解決。缺鐵的定義是體內鐵儲存耗竭，並且增加貧血的危險，而貧血是缺鐵末期的症狀。美國自1943年開始強制實行麵粉營養強化措施，添加的營養素包括維生素B<sub>1</sub>、B<sub>2</sub>、菸鹼素與鐵，然而根據美國最新之健康調查NHANES III (1988-1994)，美國缺鐵盛行率以生育年齡女性有9-11%最高，其次是1-2歲幼兒9%，50歲以上女性也有5-7%之多，男性缺鐵率則低於2%。瑞典之調查指出其青少年之缺鐵盛行率超過15%，女性甚至高達40%。我國「第一次國民營養健康狀況變遷調查」同時利用血鐵蛋白濃度、運鐵蛋白飽和度和血紅素濃度等血液指標評估鐵營養狀況。四歲以上國人之總缺鐵率為男性2.1%，女性10.7%﹔鐵儲存耗盡之比例為男性1.3%，女性7.7%﹔缺鐵貧血率為男性0.2%，女性2.1%﹔國人缺鐵問題與歐美國家雷同，都是以無臨床症狀之缺鐵為主，並且有明顯的性別差異，以女性較男性為嚴重。除了65歲以上老人兩性之缺鐵率均高之外，男性缺鐵率最高的是13-18歲，與青春期之快速成長有關﹔女性則從13-64歲都有9%以上之缺鐵率，以30-50歲有14.2%最高，快速成長與月經都有重要的影響，另外因體重控制而減少攝食量或食物選用不當，也可能增加缺鐵之危險。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">缺鐵為一漸進而連續的變化過程，初期為體內儲存之鐵耗盡，進而使血液中運送之鐵短缺，逐漸不敷造血組織之需要，最後導致血紅素之合成不足，而造成貧血症狀。因此，缺鐵可分為「無貧血性缺鐵」與「缺鐵性貧血」兩大類。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">貧血發生之前，通常沒有明顯易辨之症狀。貧血發生之後，多種生理機能不良之症狀就明顯可辨，諸如﹕肌肉勞動效力明顯降低，無法從事劇烈短促的活動，影響肌 肉的生理和能量代謝效率，增加心臟的負荷等。缺鐵貧血與嬰幼兒精神性運動能力不良有關，並且有行為異常的現象，使心智發展明顯較差，包括﹕語言能力差，運 動協調與平衡不佳，注意力、反應靈敏度與情緒的分數均明顯較低，甚至有長期的影響，因為長期追蹤發現，缺鐵貧血幼兒於五年或十年後其認知能力與學習成就仍 然較為低落。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">無貧血性缺鐵也會降低認知能力，缺鐵之高中女生經過鐵補充之後，可以提升其語言學習與記憶能力。美國NHANES III調查中發現，6-16歲兒童青少年中，缺鐵者的數學得分顯著較健康者為低，風險比例 (odds ratio) 高達2.3。富裕社會中無貧血性缺鐵盛行率仍然居高，由於涉及學習發展，故對兒童青少年的鐵營養狀況必須密切注意。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">缺鐵影響免疫機能，根據人體與動物實驗證實，缺鐵主要影響兩項免疫功能﹕中性白血球吞噬細菌能力降低，T淋巴細胞對細胞增生劑或抗原的反應降低。缺鐵還會增加鉛中毒的危險，美國兒童中缺鐵者鉛中毒的比例較健康者高出3~4倍。因為缺鐵時小腸負責鐵吸收的蛋白質DMT1表現增加，但是它缺乏專一性，故對其他二價金屬元素，包括鉛、鉻等重金屬的吸收率也伴隨增高。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">國人缺鐵問題仍然存在，我國並未全面實行食物加鐵強化之措施，因為缺鐵問題有個人之差異，並非人人需要補鐵，而且體內鐵儲存大幅增加並不增添益處。因此發展各種補鐵食品以供消費者依個人需要選用，配合個人日常飲食以維護鐵營養之充足，有其積極正面之意義。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">已知影響鐵吸收的主要因素有鐵的化學形式與鐵可用率 (bioavailability)。鐵的化學形式主要區分為「血鐵質」﹙heme iron﹚與「非血鐵質」﹙non-heme iron﹚兩種。「血鐵質」主要來自肉類，其吸收不受其他飲食成分的影響，但是受鐵營養狀況之調節，吸收率平均25%，缺鐵時可提高到40%，鐵充足時可降到10%。長時間高溫烹調會使「血鐵質」分解成「非血鐵質」。「非鐵血質」來自各種植物性食品，鐵蛋白 (ferritin) 以及鐵補充劑等等，其吸收率平均約7.5%，缺鐵時可提高到21%，鐵充足時會降為2.5%。飲食成分會影響「非血鐵質」的吸收率，促進吸收的成分主要有維生素C和禽畜魚等肉類，維生素C含量在25-100 mg之間與鐵吸收率有正比關係，增高劑量並無進一步的效益。肉類包括禽、畜、魚貝等動物之肌肉蛋白質，其消化分解之小分子產物可以與鐵形成可溶性錯合物以增加鐵的溶解度而促進吸收。西式乳酸發酵之蔬菜、發酵黃豆製品也有促進鐵吸收的效益。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">由於飲食鐵質之吸收並不完全，故以鐵可用率代表食物或飲食中可被人體正常消化、吸收並供生理利用的鐵，這是綜合數個生理過程的結果，這些過程大致上可分為三個步驟：（1）消化，（2）小腸細胞攝入鐵（iron uptake）與血液運輸，及（3）形成功能性蛋白質以執行生理功能。因此，測量上述過程可以反映鐵可用率。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 14pt;">二、鐵可用率評估原理</span></strong><strong><sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 14pt;">(4, 15, 16)</span></sup></strong><strong><sup> </sup></strong></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">目前食物鐵可用率的評估方法分為體外（in vitro）測量法、動物實驗法與人體實驗法三種。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">體外測量法有體外消化透析法（in vitro digestion and dialysis）與體外消化&frac34;Caco-2細胞攝鐵法 (in vitro/Caco-2 cell culture model)。體外消化透析法是根據可溶性、小分子鐵錯合物才可能被人體吸收的原理，採用模擬胃腸消化作用之條件，將食物消化分解後，利用透析膜分離小分子含鐵成分，稱為「可透析鐵」﹙dialyzable iron﹚，測量其比例以間接代表鐵可用率，所得之結果與人體鐵吸收率顯著相關。體外消化&frac34;Caco-2細胞攝鐵法除了利用模擬胃腸消化作用之條件與透析膜分離小分子含鐵成分之外，加上細胞模式以模擬小腸之吸收作用，吸收之鐵可誘導細胞內鐵蛋白之生合成，兩者有正相關性，故以鐵蛋白量間接代表鐵可用率。Caco-2細胞源自人類大腸腺細胞瘤（colon adeno-carcinoma），會自發性分化，並擁有許多小腸細胞的特性，包括極化（polarization）的型態、形成微絨毛（microvilli）與tight junction，細胞內有儲鐵用之鐵蛋白，並且具有與鐵吸收相關的DMT1、HFE等各種蛋白質，多種促進或抑制鐵吸收之成分可影響其攝鐵作用，與小腸之反應相似。在美國國家衛生院﹙NIH﹚ the Office of Dietary Supplements與the American Society of Nutritional Sciences 的研討會中，此法被認為具有高度的應用價值，所測得之結果與人體鐵吸收率顯著相關。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">動物實驗法採用最為普遍的是AOAC (Association of Official Analytical Chemists) 建議之「大鼠血紅素再生法」 (rat hemoglobin repletion bioassay)。其原理是利用缺鐵貧血大鼠對食物鐵質有最大的吸收能力，並且優先用於合成血紅素，故飼以含鐵食物或化合物後，追蹤其血紅素濃度之增加，可以反映食物之鐵可用率，可用來區別不同鐵源的利用效率。此法屬於『終點』﹙endpoint﹚測量法，符合鐵可用率的定義。國際營養性貧血顧問小組 (International Nutritional Anemia Consultative Groups) 曾經比較AOAC法與人體試驗測得之鐵可用率，發現兩者顯著相關，可作為人體鐵可用率之參考。動物實驗法之主要限制是不適合評估促進鐵吸收之成分，因為缺鐵貧血大鼠的鐵吸收率很高，足以掩飾其他促進因子的效應。AOAC法自1974年建立以來並無任何修訂版本，然而隨著動物實驗技術之進步，以及鐵吸收機制之新知，其基礎飼料配方已不適用，修訂之配方（表一）及條件應參考蕭氏之行政院衛生署委託計畫研究報告《改良並建立我國保健食品補鐵機能評估的檢測方法》<sup><span>(36)</span></sup>。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">人體實驗法可以直接反映食品之鐵可用率，是補鐵功能的最佳指標。雖然鐵之吸收利用可以放射性同位素鐵追蹤定量，但此等方法在國內難以執行。可行的方法是以 缺鐵貧血者為試驗對象之血紅素增生法，提供促進鐵吸收健康食品，使其依照食品使用說明服用，定期追蹤血紅素等鐵營養相關指標之增加量，據以評估鐵可用率。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">人體對鐵之吸收利用有其恆定調控機制，健康食品可以經由改變鐵之形式，提供促進鐵吸收之成分或去除抑制鐵吸收之成分等策略以提高食品之鐵可用率。因此健康食品促進鐵吸收功效可以依產品特性採用不同評估方法（表一）。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗結果符合下列三項標準之一，即可評定為具有促進鐵吸收之功能： </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">人體實驗結果獲得顯著的促進效應 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">體外消化&mdash;Caco-2細胞攝鐵實驗或大鼠血紅素再生實驗獲得顯著的促進效應 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">體外消化透析法配合體外消化&mdash;Caco-2細胞攝鐵實驗，或體外消化透析法配合動物實驗獲得顯著的促進效應。&nbsp;&nbsp; </span></p><p style="text-align: left; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">表一、促進鐵吸收之產品策略與適用之評估方法</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">&nbsp;&nbsp; <br></br></span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 14pt;"><table style="border-collapse: collapse;" border="0" cellspacing="0" cellpadding="0"> <tbody> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: 1pt solid windowtext; width: 145.4pt;"> <p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">產品策略</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: 1pt 1pt 1pt medium; border-style: solid solid solid none; border-color: windowtext windowtext windowtext currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 310.9pt; -moz-border-top-colors: none; -moz-border-right-colors: none; -moz-border-bottom-colors: none; -moz-border-left-colors: none; -moz-border-image: none;"> <p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">適用之評估方法</span> </p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt; border-style: none solid solid; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 145.4pt; -moz-border-top-colors: none; -moz-border-right-colors: none; -moz-border-bottom-colors: none; -moz-border-left-colors: none; -moz-border-image: none;"> <p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">改變鐵之形式</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt medium; border-style: none solid solid none; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 310.9pt;"> <ol style="list-style-type: decimal;"> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">人體試驗</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">大鼠血紅素再生法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化</span><span style="font-family: symbol; font-size: 13pt;">&frac34;</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞攝鐵法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化透析法＋體外消化</span><span style="font-family: symbol; font-size: 13pt;">&frac34;</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞攝鐵法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化透析法＋大鼠血紅素再生法</span> </li> </ol> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt; border-style: none solid solid; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 145.4pt; -moz-border-top-colors: none; -moz-border-right-colors: none; -moz-border-bottom-colors: none; -moz-border-left-colors: none; -moz-border-image: none;"> <p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">提供促進鐵吸收之成分</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt medium; border-style: none solid solid none; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 310.9pt;"> <ol style="list-style-type: decimal;"> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">人體試驗</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化</span><span style="font-family: symbol; font-size: 13pt;">&frac34;</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞攝鐵法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化透析法＋</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞實驗</span> </li> </ol> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt; border-style: none solid solid; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 145.4pt; -moz-border-top-colors: none; -moz-border-right-colors: none; -moz-border-bottom-colors: none; -moz-border-left-colors: none; -moz-border-image: none;"> <p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">去除抑制鐵吸收之成分</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium 1pt 1pt medium; border-style: none solid solid none; border-color: currentcolor; padding: 0cm 1.4pt; width: 310.9pt;"> <ol style="list-style-type: decimal;"> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">人體試驗</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">大鼠血紅素再生法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化</span><span style="font-family: symbol; font-size: 13pt;">&frac34;</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞攝鐵法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化透析法＋</span><span style="font-family: 新細明體,serif; font-size: 13pt;">Caco-2</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">細胞攝鐵法</span> </li> <li style="color: black;"><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">體外消化透析法＋大鼠血紅素再生法</span> </li> </ol> </td> </tr> </tbody></table><br></br></span></strong></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 14pt;">三、評估方法與步驟</span></strong><strong> </strong></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="font-size: 16px;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></strong></span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（一）體外消化透析法（in vitro digestion and dialysis）：簡稱「透析法」</span></strong><sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">(17-21)</span></sup> </p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1.</span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">儀器設備</span></strong> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">吸收光譜儀（ </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">atomic absorption photometer</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">）、分光光度計（spectrophotometer）。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">主要器材</span></strong><strong><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> &nbsp;</span></strong> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">透析膜MWCO 6,000〜8,000 (Spectra/Por)，使用之前以去離子水浸泡12小時；有蓋高型玻璃燒杯，容量100-150 mL；透析膜夾等。實驗用玻璃器皿均應以酸液浸泡，經去離子水沖淨，去除鐵之污染後方可使用。 </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">藥品與試劑</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">胃蛋白酶（pepsin）：porcine，活性800-2500 units/mg protein。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">胰臟酵素 (pancreatin)：porcine，活性4 x U. S. P. specifications。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">膽汁萃取物 (bile extract)：glycine and taurine conjugates of hyodeoxycholic and other bile salts。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">各種酸鹼試劑與藥品必須無微量礦物質污染，包括：HCl、NaHCO<sub>3</sub>、trichloroacetic acid (TCA)、hydroxylamine hydrochloride、sodium acetate、bathophenanthroline disulfonate、原子吸光分析用鐵標準溶液等。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">胃蛋白酶溶液（pepsin solution），簡稱「胃液」</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每100 mL的0.1 N HCl溶液中含2.5-5 g胃蛋白酶，加入離子交換樹脂 (Chelex-100) 2.5-5 g，室溫震盪反應30分鐘，離心或過濾移除樹脂以去除試劑中之鐵後，置於玻璃血清瓶中，儲存於4℃下，於一星期之內使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">胰液－膽鹽懸浮液（pancreatin-bile suspension），簡稱「胰液」</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每100 mL的0.1 M NaHCO<sub>3</sub>溶液中含0.2-0.4 g 胰臟酵素及1.2-2.5 g膽汁萃取物，加入離子交換樹脂 (Chelex-100) 15 g，室溫震盪反應30分鐘，離心或過濾移除樹脂以去除試劑中之鐵後，置於玻璃血清瓶中，儲存於4℃下，於一星期之內使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">還原劑溶液 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">於250 mL去離子水中溶解100 g hydroxylamine hydrochloride，加入離子交換樹脂 (Chelex-100) 2-5 g，室溫震盪反應30分鐘，離心或過濾移除樹脂以去除試劑中之鐵後，置於玻璃血清瓶中備用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">蛋白質沉澱劑 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;100 g TCA</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">以去離子水定容至500 mL，嚴防鐵污染。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">鐵呈色劑，可透析鐵定量分析之用，組成分為： </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;250 mg bathophenanthroline disulfonate</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">先溶於50 mL 去離子水，再加入250 mL還原劑溶液及4M Na-acetate溶液500 mL，最後以去離子水定容至1L。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">鐵對照溶液 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; &nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">以FeSO<sub>4</sub> 溶於0.01 N HCl，適用的濃度為10-100 &mu;M，實驗時選用與測試樣品相當之濃度，使用時新鮮配製。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">4. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗方法及步驟</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次實驗應包含以下組別： </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（1）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">控制組：鐵對照溶液或其與不含健康食品之基礎飲食的組合，含鐵量與實驗組相當，除了不含健康食品之外，基礎飲食之組成與特性應與實驗組相近。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（2）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">正對照組：鐵對照溶液或其與不含健康食品之基礎飲食的組合，含鐵量與實驗組相當，除了不含健康食品之外，基礎飲食之組成與特性應與實驗組相近，另外加入ascorbic acid，使莫耳數比例ascorbate：Fe = 20：1。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（3）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗組：健康食品或含健康食品之飲食，鐵量與控制組相當。健康食品若添加含鐵成分，應符合我國「食品衛生管理法」、「食品添加物使用範圍與用量標準」等相關法規。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次實驗各種處理至少應有二重複，每個實驗至少重複兩次。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">體外法必須小心控制的條件是pH值、酵素活性與反應時間，圖一為透析法的實驗流程。測試樣品若為液態則可直接使用，若為固型物則需加入適量去離子水，以研磨機將樣品均質成乳狀「樣品漿」，紀錄樣品與水之比例與重量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">模擬胃液消化反應</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">樣品液或「樣品漿」以6N HCl調為pH 2，每100 g樣品液加入5 mL胃蛋白酶溶液，於37℃下震盪反應2小時而得「胃消化物」，取20 g 供酸度滴定之用，其餘暫時冰凍保存以待下一步模擬小腸消化反應與鐵定量之用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">酸度滴定</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">目的是定量「胃消化物」加上「胰液」後，欲使混合物酸鹼度達到小腸環境之pH 7.5，所需之KOH當量數。對20g的胃消化物加入5 mL的胰液，混合均勻後，以0.5N KOH滴定至pH 7.5，紀錄所需KOH當量數，換算為NaHCO<sub>3</sub>量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">模擬小腸消化反應</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">準備透析袋，利用酸度滴定結果，將中和所需之NaHCO<sub>3</sub>溶於25 mL去離子水，裝入透析袋中，袋口夾緊毋使滲漏以備用。將冰凍之「胃消化物」解凍，以20 g為單位秤取分裝，分別置於100 ml燒杯中，然後將透析袋置入燒杯中，加蓋，於37℃下震盪反應30分鐘，使鹼度升高到pH 5，然後加入5 mL 「胰液」，繼續反應2小時。結束時，取出透析袋，以去離子水和緩地沖洗其外部以去除消化物之干擾後，倒出袋中透析液，收集於塑膠離心管或玻璃瓶中，紀錄體積後，供可透析鐵之定量分析。</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">5. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">分析項目與方法</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">樣品總鐵量分析</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">剩餘「胃消化物」秤取適量，經灰化處理後，灰份以濃HCl溶解完全，經適當稀釋後，以比色法或原子吸收光譜儀配合鐵標準溶液與標準檢量線而定量。灰化反應需嚴防鐵污染，所需容器必須浸泡酸液後充分清洗方可使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">可透析鐵量分析</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">取定量透析液，加入蛋白質沉澱劑（沉澱劑：透析液＝1：2，v/v），充分混合後，於沸水浴中加熱10分鐘，4000 &times;g離心10分鐘去除蛋白質沉澱。取上清液置於試管中，加入鐵呈色劑（上清液：鐵呈色劑 = 1：1,，v/v），反應10分鐘後，測定波長535 nm吸光值，比對鐵標準檢量線求出濃度。鐵標準檢量線以鐵標準溶液（線性範圍0.5 - 4 ppm）經相同之鐵呈色定量步驟，測得吸光值後而製作。上清液若經適當消化分解有機物質後，也可以採用原子吸收光譜儀測定其鐵量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">6. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">計算</span></strong><strong> </strong></p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">各組之「可透析鐵」以下列公式計算，並以百分比（%）表示：</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"></span><br></br><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="font-size: 16px;"><br></br></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"><img alt="" width="723" height="65" style="width: 723px; height: 65px;" src="../Files/images/law/FE01.jpg"></img>&nbsp;&nbsp; </span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次實驗各種處理至少應有二重複，每個實驗至少重複兩次。若各次實驗之間沒有顯著差異，則實驗結果可以合併以計算可透析鐵比例之平均值與標準偏差，並以標準偏差對平均值之百分率代表該分析之變異係數 (coefficient of variation, CV)。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">測試樣品「鐵可用率」以實驗組之「可透析鐵」比例平均值對控制組之「可透析鐵」比例平均值之百分率表示。正對照組之「鐵可用率」以該組之「可透析鐵」比例平均值對控制組之「可透析鐵」比例平均值之百分率表示。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">7. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">結果評定</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">促進鐵吸收之判斷標準為實驗組之「鐵可用率」大於100% + 2 &times; CV﹙實驗組﹚，表示有促進鐵吸收之性質，可用率數值越高越好，以超過ASC組者為最優；「鐵可用率」小於100% - 1 &times; CV﹙實驗組﹚者表示測試樣品可能有抑制鐵吸收之性質。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;<img alt="" width="740" height="872" style="width: 740px; height: 872px;" src="../Files/images/law/FE02.jpg"></img><br></br><br></br><br></br><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></strong></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（二）體外消化&mdash;Caco-2細胞攝鐵實驗：簡稱「細胞實驗」</span></strong><sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">(22-32)</span></sup> </p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">儀器設備</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">二氧化碳細胞培養箱（CO<sub>2</sub> incubator）與細胞培養操作之基本設施、迴轉<strong>式震盪器</strong>、原子吸收光譜儀或同類儀器、酵素免疫分析儀（ELISA reader）<strong>。</strong></span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">主要器材</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;75-cm<sup>2</sup> </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">培養瓶或培養皿（culture flask or culture dish）、彈性矽膠帶（silicon ring）、collagen處理之六槽細胞培養盤（collagen treated 6-wells culture dish）、塑膠離心管、透析膜MWCO 12,000-14,000（12-14K, Spectra/Por），使用前以去離子水浸泡12 hr。細胞培養盤內槽（Transwell insert ring），使用前槽底外部覆以透析膜（圖二），用彈性矽膠帶固定，以70%酒精殺菌後，浸置於無菌水中備用。實驗用玻璃器皿均應以酸液浸泡，經去離子水沖淨，去除鐵之污染後方可使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">藥品與試藥</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞培養基：Minimum Essential Medium (MEM)，配方中不含外加鐵，鐵濃度不可超過 8 &mu;g/L</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞生長培養液（growth medium）﹕簡稱「生長液」，供細胞增生與維持之用，組成分含有：DMEM（Dulbecco&rsquo;s Modified Eagle Medium）、</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; 10% (v/v) FBS</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（fetal bovine serum）、25 mmol/L HEPES、1% antibiotic-antimycotic solution</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; MEM</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">營養液：攝鐵反應之細胞培養液，使用時新鮮配製，以MEM為溶劑，並加入：10 mmol/L PIPES、1% antibiotic-antimycotic solution、hydrocortisone (4 mg/L)、insulin (5 mg/L)、sodium selenite (5 &mu;g Se/L)、triiodothyronine (34 &mu;g/L)，epidermal growth factor（20 &mu;g/L）。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞清洗液﹕簡稱「清洗液」，於實驗開始、中途變換培養條件、實驗結束時，用來清洗細胞，以去除前段培養液的影響，組成份為：</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; 140 mM NaCl</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">、5 mM KCl、10 mM PIPES（piperazine-N,N&rsquo;-bis-[2-ethanesulfonic acid]） pH 7.0。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">除鐵溶液（iron removal solution）：簡稱「除鐵液」，用來減少細胞上非專一性結合之鐵，以「清洗液」為溶劑，於使用時加入鐵螯合劑等其他成分，組成份除了「清洗液」之外，加入：1 mM bathophenanthroline disulfonic acid（BPDS）、5 mM sodium hydrosulfite。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; EBSS/MES</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">溶劑：使用時新鮮配製，組成份為：Earle&rsquo;s balanced salt solution (EBSS)、10 mM MES (2-[4-morpholino]-ethanesulfonic acid) buffer pH 6.0。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">鐵對照溶液：供攝鐵實驗中控制組之用，含有EBSS/MES溶劑與10-100 &mu;mol/L FeSO<sub>4</sub>。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">正對照組溶液 (ASC)：供攝鐵實驗中正對照組之用，含有EBSS/MES溶劑、10-100 &mu;mol/L FeSO<sub>4</sub>、ascorbic acid﹙對Fe莫耳比例為20：1﹚。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">負對照組溶液 (NTA)：供攝鐵實驗中負對照組之用，含有EBSS/MES溶劑、10-100 &mu;mol/L FeSO<sub>4</sub>、nitrilotriacetic acid﹙對Fe莫耳比例為5：1﹚。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">體外消化用藥品及試劑與體外消化透析法所用相同</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">其他試劑有市售鐵蛋白酵素免疫分析試劑組（Ferritin ELISA kit）、Bio-Rad DC protein 試劑等</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">4. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞株來源與培養條件：</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;Caco-2</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞株可購自新竹食品工業研究所或美國ATCC (American Type Culture Collection, Rockville, MD)。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">細胞培養於生長液中，接種密度為5.6&times;10<sup>3 </sup>cells/cm<sup>2</sup>，或1.68&times;10<sup>4</sup> cells/mL。二氧化碳培養箱之氣體條件為5%CO<sub>2</sub>/95% air，維持飽和溼度，每三天更新生長液。細胞增生至80-100%滿盤 (confluency) 時可進行繼代培養（subculture）。繼代培養時，以trypsin-EDTA處理使細胞脫離盤底，離心收集，計數細胞數目，調整濃度至接種密度以進行培養。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">5. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">攝鐵實驗用細胞準備：</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">取80-100% 滿盤的Caco-2細胞，以trypsin-EDTA處理收集，用生長液將細胞密度調為5&times;10<sup>4</sup> cells/cm<sup>2</sup> 或1.65&times;10<sup>5</sup> cells/mL，置入六槽培養盤，每2天更新一次生長液，於12 - 14天後細胞增生達到90 ~ 100% 滿盤，即可開始攝鐵實驗。此時細胞間生成緊密的構造（tight intercellular junctions），使物質無法從細胞間隙通透，而必須從細胞膜攝入。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">6. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">試驗樣品之處理</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">視健康食品的物性而定，若健康食品為液態，並且不需要消化即可吸收，則直接進行細胞攝鐵實驗。若健康食品為固態，或必須經過消化後方能發揮作用或吸收，則需進行下述之消化反應：取適量食品與120 mmol/L NaCl溶液混合均質，使均質液之蛋白質濃度約為0.5 mg/10 mL，並以6N HCl調整至pH 2後，取10 mL均質液加入「胃液」0.5 mL，置於塑膠離心管中，加蓋後水平放置，於37℃下震盪反應1小時而得「胃消化物」，然後以1 mol/L NaHCO<sub>3</sub>逐滴加入以調整其酸鹼度達pH 6.0，加入2.5 mL「胰液」，以NaOH調整至pH 7.5，最終體積以120 mmol/L NaCl溶液定容為15 mL，暫稱為「待消化物」，立即用於細胞攝鐵實驗，實驗流程如圖二所示。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">7. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗設計及步驟</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次攝鐵試驗應包含以下組別：</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（1）控制組：以鐵控制溶液替代實驗樣品，可依需要採用單一鐵量或系列鐵量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（2）正對照組：以ASC溶液替代實驗樣品，可依需要採用單一鐵量或系列鐵量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（4）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">負對照組：以NTA溶液替代實驗樣品，可依需要採用單一鐵量或系列鐵量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（5）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗組：健康食品溶液或「待消化物」，含鐵量與控制組相同，可依需要採用單一鐵量或系列鐵量。健康食品若添加含鐵成分，應符合我國「食品衛生管理法」、「食品添加物使用範圍與用量標準」等相關法規。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次實驗各種處理至少應有二重複，每個實驗至少重複兩次。若各次實驗之間沒有顯著差異，則實驗結果可以合併進行統計分析，計算平均值與標準偏差。 </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">攝鐵實驗開始時，先將「生長液」吸除，以MEM清洗兩次，各槽加入「MEM營養液」1.0 mL。每槽置入一個透析內槽，內槽中加入2.5 mL各組樣品液或「待消化物」，加蓋後置於迴轉釋震盪器反應，震盪速度每分鐘6轉，反應時間2小時，然後移去內槽，培養盤移入培養箱繼續反應滿24小時，即可收集細胞以供分析。每次實驗必有不含細胞，但其他處理均相同之空白組以供鐵定量對照之用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">攝鐵反應結束時，先收集空白組槽內全部溶液，以供鐵之定量。其餘含細胞各槽，以2 mL「清洗液」清洗細胞後吸除，加入2 mL去離子水，於4℃冷房中以桌上型超音波震盪器震盪處理15分鐘，刮下細胞，並收集槽內全部溶液，貯存於 -20℃，以待後續分析。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">8. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">分析項目與方法</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">各槽之細胞蛋白質量可以0.5 N NaOH完全溶解細胞後，採用Bio-Rad DC protein 試劑半微量法分析定量。細胞「鐵蛋白」含量以市售酵素免疫分析試劑組依其說明定量分析，結果以每槽「鐵蛋白」總量表示。食材、培養液、細胞液等之鐵含量以原子吸收光譜儀定量。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">9. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">統計分析與計算</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">每次實驗各種處理至少應有二重複，每個實驗至少重複兩次。若各次實驗之間沒有顯著差異，則實驗結果可以合併用於計算「鐵蛋白」量之平均值與標準偏差，並以標準偏差對平均值之百分率代表該分析之變異係數 (coefficient of variation, CV)。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">採 用單一鐵量時，測試樣品之「鐵可用率」以實驗組「鐵蛋白」量平均值對鐵控制組「鐵蛋白」量平均值之百分率表示。正對照組之「鐵可用率」以該組「鐵蛋白」量 平均值對鐵控制組「鐵蛋白」量平均值之百分率表示。負對照組之「鐵可用率」以該組「鐵蛋白」量平均值對鐵控制組「鐵蛋白」量平均值之百分率表示。採用系列 鐵量時，各樣品先以「鐵蛋白」量對樣品鐵量製作劑量反應曲線並計算斜率。測試樣品之「鐵可用率」以實驗組斜率對鐵控制組斜率之百分率表示。正對照組之「鐵 可用率」以該組斜率對鐵控制組斜率之百分率表示。負對照組之鐵可用率以該組斜率對鐵控制組斜率之百分率表示。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">10. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">結果評定</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">促進鐵吸收功能之判斷標準為實驗組「鐵可用率」大於100% + 2 &times; CV﹙實驗組﹚，表示有測試樣品有促進鐵吸收之性質，可用率越高越好，以超過ASC組者為最優；「鐵可用率」小於100% - 1 &times; CV﹙實驗組﹚者表示測試樣品可能有抑制鐵吸收之性質。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;<img alt="" width="935" height="790" style="width: 740px; height: 626px;" src="../Files/images/law/FE03.png"></img><br></br><br></br><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></strong></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（三）動物實驗：</span></strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">大鼠血紅素再生法，簡稱「血紅素再生法」<sup><span>(33-43)</span></sup></span> <span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">，主要參考資料為行政院衛生署委託計畫研究報告《改良並建立我國保健食品補鐵機能評估的檢測方法》<sup><span>(36)</span></sup></span><sup> </sup></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗動物</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗動物採用Wistar雄性大鼠，鼠齡限定為離乳，約四週大，體重不宜超過70公克，以快速達到缺鐵貧血階段，縮短耗鐵期時間。若動物體重較大，則耗鐵期時間必然增長，方能達到必要的缺鐵貧血程度。實驗動物之飼養遵循基本程序，大鼠個別飼養於不鏽鋼絲籠中，動物室溫度維持在25&plusmn;2℃，溼度維持50%，光暗週期各為12小時。實驗期間供給去離子水。水與飼料均採自由攝食。動物管理應遵循國科會《實驗動物管理及使用守則》<sup><span>(43)</span></sup>。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">藥品與試劑</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp; Drabkin&rsquo;s</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">試劑含1 g NaHCO<sub>3</sub>、50 mg KCN、200 mg K<sub>3</sub>Fe(CN)<sub>6</sub> ，溶於1L 蒸餾水中，貯於棕色瓶中備用。本試劑含氰化物，毒性大而危險，不可以口吸取，廢液需集中處理，不可倒入水槽。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">各種酸鹼試劑與藥品必需無微量礦物質污染。各項分析用玻璃器皿均應以酸液浸泡，經去離子水沖淨，去除鐵之污染後方可使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">飼料配方</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">「基礎飼料」採用AIN-76或AIN-93G配方，但其碳水化合物完全採用玉米澱粉，其礦物質混合物中不加鐵，其組成列於表二，此飼料之鐵濃度應不超過3 ppm。標準對照組於「血紅素再生期」﹙簡稱「再生期」﹚用含鐵飼料稱為「鐵標準飼料」，乃以「基礎飼料」添加FeSO<sub>4</sub>&middot;7H<sub>2</sub>O而配成之一套四種鐵濃度之飼料，鐵的含量分別有6、12、18及24 ppm。實驗組再生期用含鐵飼料稱為「試驗飼料」，乃以測試樣品提供鐵質，加上「基礎飼料」調配而成之一套四種鐵濃度之飼料，使鐵的含量分別為6、12、18及35 ppm，同時測試樣品所提供之熱量營養素應從基礎飼料中扣除，使「試驗飼料」之熱量營養素比例與「鐵標準飼料」相當。每一種樣品需要一套含四種鐵濃度之「試驗飼料」。健康食品若添加含鐵成分，應符合我國「食品衛生管理法」、「食品添加物使用範圍與用量標準」等相關法規。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">4. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗設計</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗組別應包括：</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（1）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">基礎飼料組：6-7隻Wistar鼠，實驗期間全程飼以「基礎飼料」。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（2）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">標準對照組：共有4組，每組採用6-7隻Wistar鼠，再生期間飼以「鐵標準飼料」，每組一種鐵濃度。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（3）</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗組：每一種樣品需要4組動物，每組採用6-7隻Wistar鼠，再生期間飼以「試驗飼料」，每組一種鐵濃度。</span><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">表二、大鼠血紅素再生法用「基礎飼料」</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">AIN-76</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">與</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">AIN-93G</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">配方的組成</span> </p><table style="border: currentcolor; border-collapse: collapse;" border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"> <tbody> <tr> <td valign="top" style="border-width: 1pt medium; border-style: solid none; border-color: windowtext rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">AIN-76<sup>1</sup> </span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: 1pt medium; border-style: solid none; border-color: windowtext rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">(g/kg)</span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: 1pt medium; border-style: solid none; border-color: windowtext rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">AIN-93G<sup>2</sup> </span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: 1pt medium; border-style: solid none; border-color: windowtext rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">(g/kg)</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Casein</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">200.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Casein</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">200.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Cornstarch</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">650.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Cornstarch</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">629.486</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Soybean oil</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;50.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Soybean oil</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;70.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Fiber</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;50.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Fiber</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;50.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Mineral mix AIN76, </span></p> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Fe-free<sup>3</sup>,</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;35.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Mineral mixAIN93G,</span></p> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Fe-free<sup>5</sup></span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;35.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Vitamin mixture AIN76<sup>4</sup></span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;10.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Vitamin mix AIN93G<sup>6</sup></span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp;10.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">DL-methionine</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp; 3.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">L-cystine</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp; 3.000</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Choline bitartrate</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp; 2.000</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Choline bitartrate</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp; 2.500</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;">&nbsp;</p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;">&nbsp;</p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">BHT</span></p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">&nbsp; 0.014</span></p> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;">&nbsp;</p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) windowtext; padding: 0cm 1.4pt; width: 145.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Total</span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) windowtext; padding: 0cm 1.4pt; width: 72pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">1000.000</span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) windowtext; padding: 0cm 1.4pt; width: 126pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">Total</span></p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) windowtext; padding: 0cm 1.4pt; width: 74.7pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">1000.000</span></p> </td> </tr> </tbody></table><p style="text-align: justify; line-height: 22pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"></span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1 AIN 1977 (38)</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2 Reeve et al. 1993 (41)</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3 AIN-76 Fe-free mineral premix contains the following components in g per kg mixture: calcium phosphate, dibasic, 500; tri-potassium citrate, monohydrate, 220; NaCl, 74; K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>, 52; MgO, 24; zinc carbonate, 1.6; manganous carbonate, 3.5; cupric carbonate, 0.3; KIO<sub>3</sub>, 0.01; sodium selenite, 0.01; chromium potassium sulfate, 12 hydrate, 0.55; finely powdered sucrose, 124.</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">4 Vitamin mix AIN 76 contains the following components in per kg feed: thiamin.HCl, 0.6 g; riboflavin, 0.6 g; pyridoxine.HCl, 0.7 g; nicotinic acid, 3.0 g; D-calcium pantothenate, 1.6 g; folic acid, 0.2 g; D-biotin, 0.02 g; cyanocobalamin, 0.001 g; retinyl palmitate, 400,000 IU; dl-&alpha;(all-rac)-tocopheryl acetate, 5000 IU; cholecalciferol, 100,000 IU; menadione, 0.005; finely powdered sucrose, 980.</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">5 Iron-free mineral mix AIN-93G contains the following components in g per kg mixture: calcium carboneta, 357; potassium phosphate, monobasic, 157;tri-potassium citrate, monohydrate, 102; NaCl, 74; K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>, 46; MgO, 24; zinc carbonate, 1.65; manganous carbonate, 0.63; cupric carbonate, 0.3; KIO<sub>3</sub>, 0.01; sodium selenite, 0.01025; chromium potassium sulfate, 12 hydrate, 0.275; ammonium paramolybdate, 4 hydrate, 0.00795; sodium meta-silicate, 9 hydrate, 1.45; lithium chloride, 0.0174; boric acid, 0.0815; sodium fluoride, 0.0635; nickel carbonate, 0.0318; ammonium vanadate, 0.0066; finely powdered sucrose, 235.</span> </p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">6 Vitamin mix AIN 93G contains the following components in g per kg feed: thiamin.HCl, 0.6; riboflavin, 0.6; pyridoxine.HCl, 0.7; nicotinic acid, 3.0; D-calcium pantothenate, 1.6; folic acid, 0.2; D-biotin, 0.02; cyanocobalamin, 0.0025; retinyl palmitate, 400,000 IU; dl-&alpha;(all-rac)-tocopheryl acetate, 7500 IU; cholecalciferol, 100,000 IU; K-1, 0.075; finely powdered sucrose, 974.655.</span> </p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">5. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實驗方法及步驟</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">根據AOAC的標準實驗程序，大鼠採耗鐵期及再生期兩階段飼養。動物實驗之流程如圖三所示。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">耗鐵期</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">全數離乳大鼠餵飼「基礎飼料」，期間每週紀錄動物體重，飼養期間可以尾巴採血法採取血樣，測量血紅素濃度以追蹤血紅素值變化，直到血紅素降至6 g/dL以下，大約需14至21天。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">再生期</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">大鼠達到預定之缺鐵貧血程度後，依其體重分組使各組平均體重相當，組間沒有顯著差異。取一組餵飼「基礎飼料」。取四組餵飼「鐵標準飼料」，每組一種鐵濃度。每一種「試驗飼料」需取四組大鼠，每組餵飼一種鐵濃度。再生期間定時紀錄飼料攝取量，於第10與14天秤量體重，並自尾巴採血測量血紅素值。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">6. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">分析項目與方法</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">鐵量分析</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">飼料或測試樣品經灰化後，灰份以濃HCl溶解完全，經適當稀釋後，以原子吸收光譜儀配合鐵標準溶液與標準檢量線而定量。灰化反應需嚴防鐵污染，所需容器必須泡酸後充分清洗方可使用。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt; text-decoration: underline;">血紅素分析</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp; </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">採用cyano-methemoglobin法，以Drabkin&rsquo;s試劑呈色，反應在玻璃或塑膠試管中進行，每個樣品需要二重複分析。每支試管中加入5.0 mL Drabkin's 試劑與全血20 &mu;l，對照組以蒸餾水替代全血。試劑與樣品充份振盪混合後，靜置10 min，以分光光譜儀測量波長540 nm之吸光值，經乘以36.8可得血紅素濃度以g/dL表示。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">7. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">計算與統計分析</span></strong><strong> </strong></p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">再生期間鐵攝取量以各組飼料鐵濃度乘以飼料攝取重量而得。大鼠的血液體積以每公克體重有0.067 mL 估計，血紅素的含鐵量以0.335% 計算。代表鐵利用之生物指標可採用再生後血紅素濃度、再生期血紅素濃度增加量或再生期血紅素鐵增加量，其計算原則列於表三。</span><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">表三</span> <span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">血紅素再生法可用的鐵利用率指標</span> </p><table width="594" style="border: currentcolor; width: 445.85pt; border-collapse: collapse;" border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"> <tbody> <tr> <td valign="top" style="border-width: 1.5pt medium 1pt; border-style: solid none; border-color: green rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 136.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">鐵可用率相關項目</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: 1.5pt medium 1pt; border-style: solid none; border-color: green rgb(236, 233, 216); padding: 0cm 1.4pt; width: 309.45pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">計算原則</span> </p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 136.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">血紅素增加量</span> </p> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">（</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">mmol/L</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">）</span> </p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 309.45pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">再生期之血紅素濃度－耗鐵期結束之血紅素濃度</span> </p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 136.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">血紅素總鐵量</span> </p> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">（&mu;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">mol Hb/ rat</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">）</span> </p> </td> <td valign="top" style="padding: 0cm 1.4pt; border: rgb(236, 233, 216); width: 309.45pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">大鼠體重</span> <span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">&times;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">0.067 </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">&times;血紅素濃度</span> <span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">&times;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">0.335%</span></p> </td> </tr> <tr> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1.5pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) green; padding: 0cm 1.4pt; width: 136.4pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">血紅素鐵增加量</span> </p> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">（&mu;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">mol Fe/ rat</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">）</span> </p> </td> <td valign="top" style="border-width: medium medium 1.5pt; border-style: none none solid; border-color: rgb(236, 233, 216) rgb(236, 233, 216) green; padding: 0cm 1.4pt; width: 309.45pt; background-color: transparent;"> <p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">再生期之血紅素總鐵量－耗鐵期結束之血紅素總鐵量</span> </p> </td> </tr> </tbody></table><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">各組之間各項指標的差異以單因子變方檢定（generalized linear model）後，再以Duncan&rsquo;s multiple range test分析。將各項鐵利用指標對應飼料添加鐵量或再生期鐵攝取量以Pearson&rsquo;s correlation test進行線性迴歸分析，線性關係顯著時（<em><span>p</span></em> &lt; 0.05），計算試驗飼料組對標準飼料組之迴歸係數之比例，作為試驗樣品之相對生物價 (RBV，relative biological value)。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;</span></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">8. </span></strong><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">結果評定</span></strong><strong> </strong></p><p><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">若「試驗飼料」各組之鐵利用指標均顯著高於鐵濃度相當之「鐵標準飼料」組，而且試驗樣品之相對生物價大於100時，表示其鐵可用率優於FeSO<sub>4</sub>，可適用為促進鐵吸收之健康食品。若「試驗飼料」各組之鐵利用指標與鐵濃度相當之「鐵標準飼料」組無顯著差異或顯著較低，而且其相對生物價低於100時，表示其鐵可用率不如FeSO<sub>4</sub>，並不適用為促進鐵吸收之健康食品。</span><span style="font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;"> </span></p><p style="line-height: 18pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></p><p style="line-height: 18pt;"><img alt="" width="807" height="965" style="width: 725px; height: 868px;" src="../Files/images/law/FE04.png"></img>&nbsp;<br></br><br></br><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;"></span></strong></p><p><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">（四）人體實驗：血紅素增生法</span></strong><sup><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">(43)</span></sup> </p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">1.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實 驗計劃需遵循我國法規，經研究單位或主管機關之人體實驗審查委員會審核同意後始得進行，並遵循臨床實驗之各項規定。受試者須聽取研究說明而充分了解實驗條 件與目的後，簽訂同意書始得參與實驗。健康食品若添加含鐵成分，應符合我國「食品衛生管理法」、「食品添加物使用範圍與用量標準」等相關法規。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">2.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">受試對象：徵求有輕微缺鐵貧血 (血紅素濃度 10-11 g/dL，鐵蛋白濃度 &lt; 12 &mu;g/L)症狀，無懷孕、無任何鐵吸收異常之疾病史之婦女，隨機分為實驗組與對照組，各組約20名。先進行一般常規體檢，測量身高與體重，並抽血以測量紅血球數目（red blood cell count, RBC count）、血比容（hematocrit, Hct）、平均紅血球容積（mean corpuscular volume, MCV）、平均紅血球血紅素量（mean corpuscular hemoglobin, MCH）、平均紅血球血紅素濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC）、血紅素濃度（hemoglobin, Hb）、血清鐵（serum iron）、血清運鐵容量（total iron binding capacity）運鐵蛋白飽和度﹙transferrin saturation﹚與血清鐵蛋白濃度（serum ferritin），以供評定其鐵營養狀況。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">3.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">實 驗設計：依產品特性採用雙盲或單盲法進行，並應製備合理之「安慰劑」以供利用。實驗組依照產品說明服用「測試食品」，對照組則依照產品說明服用「安慰 劑」。研究人員應指導受試者定期領取測試食品或安慰劑，並且以服用紀錄或其他合理可行之指標追蹤服用狀況，確認受試者之合作度。服用時間為連續三個月，可 視產品特性而延長時間，但不宜超過半年。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">4.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">受試期飲食管理：受試期間，研究人員應明定受試者之飲食原則，嚴禁服用與實驗無關之含鐵補充劑，以盡量維持日常之飲食習慣為宜，並且督導受試者遵行。其飲食狀況應在營養師指導下，每個月紀錄三天飲食，以供評估實驗期間之飲食變化。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">5.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">健康紀錄：受試者每個月測量身高與體重，並記錄各項健康變化，諸如疾病、服藥、月經狀況等等。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">6.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">血液檢驗：服用測試食品滿6週與12週時，抽血檢驗紅血球數目、血比容、MCV、MCH、MCHC、血紅素濃度、血清鐵、血清運鐵容量與鐵蛋白濃度，以供評定其鐵營養狀況。各項檢驗採用臨床檢驗自動分析方法執行。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">7.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">統計分析：組內各項指標隨服用時間的變化以paired t-test檢測其差異性；各指標的變化量以服用後對服用前之差值表示，實驗組與對照組之間各指標變化量的差異性以student t test 檢測。統計顯著性以p &lt; 0.05為檢測標準。 </span></p><p style="text-indent: -18pt; margin-left: 36pt;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">8.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13.5pt;">結果評定：測試食品服用前後，平均紅血球容積、血紅素濃度與血比容在統計上有顯著的增加，而且此三指標之變化量在實驗組顯著高於對照組，即代表該產品具有促進鐵吸收之功能。 </span></p><ol> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr"></span></li></ol><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: times new roman; font-size: 13pt;"><br clear="all" style="page-break-before: always;"></br></span><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;"><strong><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 14pt;">四、參考文獻：</span></strong><strong> </strong></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt;">&nbsp;</p><ol> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">張美鈴、彭珍芳、蕭寧馨</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1998a) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">實驗用齧齒動物飼料配方</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">AIN-93G</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">之鐵質生體可用率。中華營誌</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> 23:239-250</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Bruner AB, Joffe A, Duggan AK, Casella JF and Brandt J (1996) Randomized study of cognitive effects of iron supplementation in non-anemic iron-deficient adolescent girls. Lancet 348:992-996 </span></li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Food and Agriculture Organization (1988) Requirements of vitamin A, iron, folate and vitamin B<sub>12</sub>. Rome.</span> </li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Forbes AL, Adams CE, Arnaud MJ, Chichester CO, Cook JD, Harrison BN, Hurrell RF, Kahn SG, Morris ER, Tanner JT and Whittaker P (1989) Comparison of in vitro, animal, and clinical determinations of iron bioavailability: international nutritional anemia consultative group task force report on iron bioavailibility. Am. J. Clin. Nutr. 49:225-238.</span> </li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Gleerup A, Rossander-Hulthen L, Gramatkovski E and Hallberg L (1995) Iron absorption from the whole diet: comparison of the effect of two different distribution of daily calcium intake. Am. J. Clin. Nutr. 61:97-104. </span></li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Hallberg L (1981) Bioavailability of dietary iron in man. Ann. Rev. Nutr. 1:123-148.</span> </li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Hallberg L, Bjorn-Rasmussen E, Rossander L and Suwanik R (1979) The measurement of food iron absorption in man. A methodological study on the measurement of dietary non-heme-Fe absorption when the subjects have a free choice of food items. Br. J. Nutr. 41:283-289.</span> </li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Halterman JS, Kaczorowski JM, Aligne AA, Auinger P and Szilagyi PG (2001) Iron deficiency and cognitive achievement among school-aged children and adolescents in the United States. Pediatr. 107:1381-1386. </span></li> <li style="color: black;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Looker AC, Dallman PR, Carroll MD, Gunter EW and Johnson CL (1997) Prevalence of iron deficiency in the United States. JAMA 277:973-976</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </li></ol><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">10.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Mills CF (1985) Dietary interactions involving the trace elements. Ann. Rev. Nutr. 5:173-193.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">11. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Nokes C, van den Bosch C and Bundy DAP (1998) The effects of iron deficiency and anemia on mental and motor performance, educational achievement, and behavior in children. The International Nutritional Anemia Consultative Group.</span> </p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">12. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Pirzio-Biroli G, Bothwell TH and Finch CA (1958) Iron absorption. II. The absorption of radioiron administrated with a standard meal in man. J. Lab. Clin. Med. 51:37-48.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">13. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Rossander-Hulthen L and Hallberg L (1996) Prevalence of iron deficiency in adolescents. In: Hallbert L, Asp NG, eds. Iron Nutrition in Health and Disease, pp. 149-156. London: John Libbey Co.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">14. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Shaw N, Yeh WT and Pan WH (1999) Prevalence of iron deficiency in the general population in Taiwan. Nutr. Sci. J. 224:119-138.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">15.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Wienk KJH, Marx JJM and Beynen AC (1999) The concept of iron bioavailability and its assessment. Eur. J. Nutr. 38:51-57.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">16.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Wood RJ and Tamura RT (2001) Methodological issues in assessing bioavailability of nutrients and other bioactive substances in dietary supplements: summary of workshop discussion. J. Nutr. 131:1396S-1398S.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">17. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">蕭寧馨</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1987) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">以體外實驗法評估中式黃豆加工食品中鐵之生體可用率。農化會誌</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> 25:213-221</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">18. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Kane AP and Miller DD (1984) In vitro estimation of the effects of selected protein on iron bioavailability. Am. J. Clin. Nutr. 39:393-401.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">19. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Miller DD and Schricker BR (1982) In vitro estimation of food iron bioavailability. In: Nutritional bioavailability of Iron (Kies, C. ed.), pp. 11-26. ACS symposium series, No. 203. American Chemical Society </span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">20.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Miller DD, Schricker BR, Rasmussen RR and Campen DV (1981) An in vitro method for estimation of iron availability from meals. Am. J. Clin. Nutr. 34:2248-2256.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">21.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Schricker BR, Miller DD, Rasmussen RR and Campen DV (1981) A comparison of in vivo and in vitro methods for determining availability of iron from meals. Am. J. Clin. Nutr. 34:2257-2263.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">22.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Au AP and Reddy MB (2000) Caco-2 cells can be used to assess human iron bioavailability from a semipurified meal. J. Nutr. 130:1329-1334.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">23.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Gangloff MB, Glahn RP, Miller DD and van Campen DD (1996) Assessment of iron availability using combined in vitro digestion and Caco-2 cell culture. Nutr Res 16:479-487.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">24.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Garcia MN, Flowers C and Cook JD (1996) The Caco-2 cell culture system can be used as a model to study food iron availability. J. Nutr. 126:251-258.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">25.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP and Campen DR (1997) Iron uptake is enhanced in Caco-2 cells monolayers by cysteine and reduced cysteinyl glycine. J. Nutr. 127:642-647.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">26.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP and Wortley GM (2002) Inhibition of iron uptake by phytic acid, tannic acid, and ZnCl<sub>2</sub>: studies using an invitro digestion/Caco-2 cell model. J. Agric. Food Chem. 50:390-395.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">27.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP, Cheng Z, Welch RM and Gregorio GB (2002) Comparison of iron bioavailability from 15 rice genotypes: studies using an in vitro digestion/Caco-2 cell culture model. J. Agric. Food Chem. 50:3586-3591.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">28.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP, Lai C, Hsu J, Thompson JF, Guo M and Van Campen D (1998a) Decreased citrate improves iron availability from infant formula: application of an in vitro digestion/Caco-2 cell culture. J. Nutr. 128: 257-264.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">29.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP, Lee OA, Yeung A, Goldman MI and Miller DD (1998b) Caco-2 cell ferritin formation predicts nonradiolabeled food iron availability in an in vitro digestion/Caco-2 cell culture model. J. Nutr. 128:1555-1561.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">30.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Glahn RP, Wien EM, Campen DR and Miller DD (1996) Caco-2 cell iron uptake from meat and casein digests parallels in vivo studies: use of a novel in vitro method for rapid estimation of iron bioavailability. J. Nutr. 126:332-339.</span></p><p style="text-align: justify; line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">31.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Halleux C and Schneider YJ (1991) Iron absorption by intestinal epithelial cells: 1. Caco-2 cells cultivated in serum-free medium, on polyethyleneterephthalate microporous membranes, as an in vitro model. In Vitro Cell Dev. Biol. 27A:293-302.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">32. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">Swain JH, Tabatabai LB and Reddy MB (2002) Histidine content of low-molecular-weight beef proteins influences nonheme iron bioavailbility in Caco-2 cells. J. Nutr. 132:245-251.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">33. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">張美鈴、彭珍芳、蕭寧馨</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1998b) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">市售高鈣高鐵奶粉之鐵質生體可用率。中華營誌</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> 23:251-264</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">34. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">曾淑雅、蕭寧馨</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1988) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">以血紅素再生法測定中式黃豆食品豆干和豆腐乳之鐵質相對生物價。中華營誌</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> 13:23-32</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">35. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">衛生署</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1999) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">國民營養現況。</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">1993-1996</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">國民營養健康狀況變遷調查結果。修訂版。台北市。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">36.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體;" dir="ltr">蕭寧馨 (2000) 改良並建立我國保健食品補鐵機能</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體;">評估的檢測方法。行政院衛生署委託計畫研究報告，計畫編號</span><span style="color: rgb(0, 0, 0);">DOH89-TD-10</span><span style="color: rgb(0, 0, 0);">67</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 新細明體;">。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">37. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;" dir="ltr">蕭寧馨、陳智君、陳育良</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> (1988) </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">以體外法及貧血老鼠血紅素再生法評估雞蛋、鴨蛋和皮蛋之鐵質生體可用率。農化會誌</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;"> 26:515-524</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體; font-size: 13pt;">。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">38.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">American Institute of Nutrition (1977) Report of the American institute of nutrition ad hoc committee on standards for nutritional studies. J. Nutr. 107:1340-1348.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">39. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;" dir="ltr">AOAC (1995) Bioavailability of iron. Rat hemoglobin repletion bioassay. In: Official Methods of Analysis, 15th ed. (Williams, S. ed), pp. 62-63. Association of Official Analytical Chemists.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">40.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Oser BL (1965) Hawk&rsquo;s Physiological Chemistry. 14<sup>th</sup> ed. p. 1096. McGraw-Hill, N.Y.</span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-size: 13pt;">41. </span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Reeves PG, Nielsen FH and Fahey GC (1993) AIN-93 purified diets for laboratory rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet. J. Nutr. 123:1939-1951</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">42.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Shaw N and Liu Y (2000) Bioavailability of iron from purple laver (Porphyra spp.) estimated in a rat hemoglobin regeneration bioassay. J. Agric. Food Chem. 48:1734-1737 </span></p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">43.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體;" dir="ltr">國家科學委員會﹙</span><span style="color: rgb(0, 0, 0);">1993</span><span style="color: rgb(0, 0, 0); font-family: 標楷體;">﹚實驗動物管理及使用守則。行政院國家科學委員會。台北市。</span> </p><p style="line-height: 18pt; vertical-align: bottom;"><span style="color: rgb(0, 0, 0);">44.<span style="font: 7pt/normal times new roman; font-size-adjust: none; font-stretch: normal;">&nbsp; </span></span><span style="color: rgb(0, 0, 0);" dir="ltr">Garby L, Irnell L and Werner I (1969) Iron deficiency in women of fertile age in a Swedish community. III. Estimation of prevalence based on response to iron supplementation. Acta Med. Scand. 185:113-117.</span></p>
發佈日期 2006-04-05
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